关于PCR的问题?问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/10 14:24:19

关于PCR的问题?
问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的,如果不加行不行?

1、预变性（Initial denaturation）．
模板DNA完全变性对PCR能否成功至关重要,一般95℃加热3-5分钟.
2、引物退火（Primer annealing）
退火温度一般需要凭实验（经验）决定.
退火温度对PCR的特异性有较大影响.
3、引物延伸
引物延伸一般在72℃进行（Taq酶最适温度）.
延伸时间随扩增片段长短而定.
4、循环中的变性步骤
循环中一般95℃,30秒足以使各种靶DNA序列完全变性：
变性时间过长损害酶活性,过短靶序列变性不彻底,易造成扩增失败.
5、循环数
大多数PCR含25-35循环,过多易产生非特异扩增.
6、最后延伸
在最后一个循环后,反应在72℃维持
可见94度左右应该是在这个温度能使各种靶DNA序列完全变性,这是生物学家已经研究的理论成果,72度是Taq酶最适温度,只有在这个温度下,该酶的活性才能达到最大!

关于PCR的问题?问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的 PCR说法不正确的是 A PCR的基本步骤为变性退火延伸B也需要模板DNA RNA C DNA聚合酶参加 D不需要引物做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗? 做PCR反应为什么在循环开始前要热变性5min再正式进入第一次的循环如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer? 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? ISSR-PCR引物的退火温度问题关于分子生物学PCR的一个问题菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后p PCR的退火温度怎么选择 PCR的退火温度怎么设定 PCR反应退火温度的高低与什么因素有关