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pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么

来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/31 19:28:04
pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么
在做PCR时,引物用55度的退火温度扩不出来,而用58度却扩出来了,为什么
理论上退火温度越低越利于引物和模板结合,但是有时候就是这样的,低的退火做不出来,高的做出来,我也碰到过这样的情况.其实影响PCR扩增的因素远比我们知道的多得多.我的猜测是这样的,可能刚好在这段引物或者模板上有一段容易形成发夹的序列,退火温度低的情况下,就更容易形成发夹,因而扩不出来,退火温度高的时候引物或者模板上的发夹结构被破坏,引物和模板能正常配对,所以可以扩增出来
pcr引物退火温度55度时不行,58度可以,为什么 设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度! 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? ISSR-PCR引物的退火温度问题 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 为什么PCR所用退火温度要比引物实际Tm低那么几度? 为什么PCR时会有杂带?引物没有污染,退火温度改了好多次,是特异性不好吗? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? PCR摸引物的退火温度,跑胶为什么整个泳道都弥散了,还有marker为什么跑的不好,18孔10ul 上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适 PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系?