SDS裂解法提取质粒加入氯仿异丙醇和酒精的作用-搜答案-拍题作业网

1.washbuffer中加入无水乙醇后,终浓度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,washbuffer就是洗去这些盐杂质的.2.用无水乙醇沉

我也想知道,找了一下:酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质

1、苯酚-氯仿是除蛋白的,所以要充分震荡混匀使蛋白变性,但又不能太剧烈而打断DNA；2、离心后要避免再次吸入有机相的苯酚-氯仿,尽量只取上清.

还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了,浓度越高,分子筛效应越大,质粒又比较大,当然容易拖尾了.其次也可能是你的电泳电压过大；还有就是RNA污染,你提完质粒后没有用RNase降解,不过这就不叫拖尾了,称作

苯酚对蛋白的变性效果更好,所以蛋白除去的效率更高,但是苯酚对DNA有破坏作用,不可作用时间过长.

并远远超越其原来的电荷,从而使天然蛋白质分子间的电荷差别就降低乃至消除.与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散,形状趋向—致.多肽与SDS结合的量几乎总成正比而与其序列无关.所以各种SDS蛋白质复

第一次离心是去除组织破碎的残渣,DNA位于上清液.第二次离心是氯仿异戊醇抽提,去除蛋白,DNA位于上清液.第三次是高盐低温醇溶液析出DNA,DNA位于沉淀中.

跑个电泳看看DNA质量吧,是不是用乙醇沉淀时沉淀的颜色就是黄色的,很有可能是色素,用酚氯仿多抽提几次试试看,实在不行,借个硅胶柱,一般的提取试剂盒里都有,调整好pH和盐浓度,过下柱子,色素一般会吸附到

您好!①抽提液应该包括TE（0.1mol/LEDTA,10mmol/LTris-HCl,pH8.0）和0.5%SDS.另外应该还有蛋白酶吧,否则无法裂解细胞.胰RNA酶可以在裂解异丙醇沉淀后再加.②这

酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质刚期末考完居然有人问……要再过一星期我就回答不出来了555

氯仿-异戊醇能使蛋白质变性,从而将蛋白质从溶液中析出.

细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体,提取后可用作构建基因表达载体.

氯仿、异戊醇的作用是使蛋白质变性、膜溶解.离心后上清液中含DNA,下层沉淀中含变性蛋白、膜碎片等.

2412114719联系我,

酚:氯仿:的目的是沉淀蛋白质原理如下：酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性过离心,变性蛋白质的密度比水的密

首先告诉你：酚和氯仿/异戊醇不是提取DNA方法,只是除杂的溶液!常见问题就是除杂不彻底,除杂过程导致DNA断裂.我做实验,材料里蛋白不太多不用苯酚,氯仿：异戊醇24:1就可以了.操作中一定要把溶液混匀

最好不用氯仿,氯仿毒性较大!记得我们曾用乙醇进行提取.

对于植物来说一般用CTAB法,CTAB的优势是对多糖的去除比较彻底,缺点么就是繁琐了点,一般一提要一天

一般行的,只是这一步在DNA提取中比较关键,可能会影响你所提的DNA浓度,但是做一半的后续试验是没问题的.

提取基因组DNA和细胞核DNA是不同的方法提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠：可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离CATB是一种抽提液,破坏细