质粒提取后跑电泳RNA过多

28S、18S和5S是由一个转录本剪接的,在细胞内分子数相等.分子的nt数之比等于电泳时亮度之比.28S≈3500nt18S=1869nt5S≈120nt28S:18S≈2:118S:5S≈15:1所

还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了,浓度越高,分子筛效应越大,质粒又比较大,当然容易拖尾了.其次也可能是你的电泳电压过大；还有就是RNA污染,你提完质粒后没有用RNase降解,不过这就不叫拖尾了,称作

蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.

我们是沉淀溶于TER（TE含RNaseA20μg/ml）,37℃水浴30min.

首先要知道,质粒是共价,闭合,环状的DNA（cccDNA）.以常用的碱裂解法为例：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒的cccDNA分子能够迅速复性,呈溶

细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体,提取后可用作构建基因表达载体.

这个与琼脂糖电泳有关.提取的DNA分子量很大,可能在40K到100K左右.也有可能在这个范围.但普通的琼脂糖电泳.在大分子的时候根本分别不出来.如果你有DL15000的MARKER你就知道,象那个一万

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一般在solutionI里加入RNase的.已经提取出来的质粒有RNA污染,如果直接加RNase消化RNA,则在消化后应该使用氯仿抽提去除RNase.然后再使用醋酸钠/异丙醇沉淀回收质粒.其实现在质粒

若是普通PCR,做完以后要通过电泳鉴定目的片段的大小是否为想要的,条带的亮度可以反映模板的两是否足够,也可以看是否存在引物二聚体,借此优化PCR条件和体系若是RealTimePCR,尽管可以直接看显示

现在PCR用的Taq酶只能以DNA为模板,不能以RNA为模板.所以你不能用RNA代替cDNA.再问：但是我用RNA代替cDNA，结果很多基因都扩增出来了，难道说我提的RNA全部污染了DNA。再答：　　

试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来再问：我提出来的DNA杂质太多，PCR过后电泳，拖尾现象严

总共三条带,从大到小依次是28S,18S,5S,亮度依次递减.正常情况应该是28S比18S条带亮,宽度是它的2倍,5S则很淡

提取的是总RNA的话,电泳肯定是可以看到条带的...这样的量,提取没有问题的话,直接用常规的1%-2%核酸胶就可以看到rRNA的条带（真核生物核糖体中通常含28S、18S、5.8S和5S四种rRNA；

应该会出现很多条带细胞内不仅有mRNAtRNArRNA还有一些小RNA如snRNAsnoRNAscRNA如果再加上线粒体内转录的更多

测OD的方法是测不出RNA污染的,因为RNA的260/280的值和DNA近似.电泳检测的话,主要是看RNA的含量.换而言之,实际上最相关的是你提取的时候的组织的生长状况.一般来说,如果是分生组织等提取

用琼脂糖凝胶就行,用TAE电泳缓冲液,应该是三条带,或者是抹带.再问：是和总RNA一样的条带么？再答：三条带是核糖体RNA,就是所谓的rRNA,占细胞总RNA的80%，你所说的双链RNA难道是病毒的么

质粒有环状线型和超螺旋三种状态,因为二级结构不同所以电泳中跑得快慢不一,超螺旋最快线型第二环状最慢,而空质粒是线性的其条带位置与Marker位置相符,其他两种分别在其上下两侧,你的样品大多都是三条带,

当然不一样啦RNADNA都可以用EB或者genefinder蛋白的话不需要染料电泳完如果想直接再胶上看就用考马斯亮蓝染色如果要特异性的检测某个蛋白就转膜后孵育抗体然后显色

很正常可能是DNA